__  __    __   __  _____      _            _          _____ _          _ _ 
 |  \/  |   \ \ / / |  __ \    (_)          | |        / ____| |        | | |
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  <title>Albumina</title>
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<center><font class="option" color="#000000"><b><br>
</b></font></center>
<br>
<h2 style="text-align: center;" class="art-PostHeader">Albumina
</h2>
<div class="art-PostMetadataHeader">
<div class="art-PostHeaderIcons art-metadata-icons"><a
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 href="http://www.cienciasdasaude.org/portal/wp-admin/post.php?post=1769&amp;action=edit"
 title="Editar posts"><br>
</a>
</div>
</div>
<p style="text-align: justify;"><strong><span id="more-1769"></span></strong><strong>INTRODU&Ccedil;&Atilde;O</strong><br>
O teor de prote&iacute;nas plasm&aacute;ticas no plasma
&eacute; de
aproximadamente 7 a 7,5g/dL. As prote&iacute;nas
plasm&aacute;ticas,
assim, compreendem a maior parte dos s&oacute;lidos do plasma.
Essas
prote&iacute;nas, na realidade, s&atilde;o uma mistura complexa
incluindo n&atilde;o s&oacute; as prote&iacute;nas simples
mas,
tamb&eacute;m, prote&iacute;nas mistas ou conjugadas como as
glicoprote&iacute;nas e v&aacute;rios tipos de
lipoprote&iacute;nas .As
prote&iacute;nas s&eacute;ricas compreendem principalmente as
fra&ccedil;&otilde;es albumina e globulina do plasma .A
fra&ccedil;&atilde;o albumina das prote&iacute;nas do soro
&eacute; a
mais abundante das prote&iacute;nas s&eacute;ricas, sendo
sintetizada
no f&iacute;gado. Tem um peso molecular de aproximadamente 69.000.
A
estrutura prim&aacute;ria da albumina consiste em 610
amino&aacute;cidos ordenados em uma cadeia pept&iacute;dica
simples. A
estrutura secund&aacute;ria da albumina parece apresentar as
cadeias
dobradas sobre si, para formar camadas que podem ser desenroladas por
redu&ccedil;&atilde;o do pH e novamente reenroladas por
eleva&ccedil;&atilde;o do pH.No homem a albumina &eacute; a
principal
prote&iacute;na do soro, que normalmente constitui 60% das
prote&iacute;nas totais.<strong></strong></p>
<p style="text-align: justify;"><strong>S&Iacute;NTESE</strong><br>
Sintetizada quase toda pelo f&iacute;gado, a albumina tem uma
meia-vida
de 15 a 19 dias. A s&iacute;ntese desta prote&iacute;na
est&aacute;
claramente ligada ao fornecimento de amino&aacute;cidos estruturais
ao
f&iacute;gado e da&iacute; a sua sensibilidade &agrave;
desnutri&ccedil;&atilde;o proteica. A s&iacute;ntese da
albumina
come&ccedil;a dentro de 30 minutos, quando os indiv&iacute;duos
em
deple&ccedil;&atilde;o proteica recebem quantidades suficientes
de
amino&aacute;cidos, o que sugere que a s&iacute;ntese da
albumina pode
n&atilde;o ser constante, mas ocorrer em
rela&ccedil;&atilde;o com os
suprimentos alimentares e com a absor&ccedil;&atilde;o de
subunidades
proteicas.<strong></strong></p>
<p style="text-align: justify;"><strong>DISTRIBUI&Ccedil;&Atilde;O<br>
</strong>Num indiv&iacute;duo de
tamanho m&eacute;dio, 350 gramas de
albumina fazem parte da massa corporal, estando 140 gramas no
espa&ccedil;o intravascular e 210 gramas no espa&ccedil;o
extravascular. A albumina distribui-se por toda a extens&atilde;o
do
corpo, incluindo ossos e pele, encontrando-se apenas cerca de 2 gramas
dentro do f&iacute;gado, sendo que a maior parte est&aacute;
dentro dos
canais linf&aacute;ticos.<strong></strong></p>
<p style="text-align: justify;"><strong>FUN&Ccedil;&Otilde;ES<br>
</strong>A principal
fun&ccedil;&atilde;o da albumina normal &eacute; o
transporte e armazenagem de uma ampla variedade de
subst&acirc;ncias de
baixo peso molecular, como o cortisol, horm&ocirc;nios sexuais,
c&aacute;lcio e drogas v&aacute;rias. A
qualifica&ccedil;&atilde;o
&ldquo;normal&rdquo; deve ser atribu&iacute;da, porque se
sabe que
algumas variantes de albumina podem ser alteradas na sua capacidade de
fixarem drogas como a warfarina.</p>
<p style="text-align: justify;">A
fixa&ccedil;&atilde;o, e
consequentemente a destoxifica&ccedil;&atilde;o, constitui
outra das
fun&ccedil;&otilde;es primaciais da albumina no
rec&eacute;m-nascido.</p>
<p style="text-align: justify;">A
bilirrubina fixada &agrave; albumina
tem menor probabilidade de passar para os tecidos hidr&oacute;fobos
do
c&eacute;rebro do que a bilirrubina livre.</p>
<p style="text-align: justify;">Certos
metais pesados s&atilde;o
tamb&eacute;m fixados &agrave; albumina numa forma
n&atilde;o
t&oacute;xica. Em casos de hem&oacute;lise extensa, forma-se um
complexo contendo heme chamado metahemalbumina.</p>
<p style="text-align: justify;">Desempenha
tamb&eacute;m um papel muito
importante no metabolismo das gorduras, al&eacute;m de constituir
uma
fonte de nitrog&ecirc;nio.</p>
<p style="text-align: justify;">A
a&ccedil;&atilde;o das
lipoprote&iacute;nas-lipases sobre os lip&iacute;dios libera
&aacute;cidos graxos inst&aacute;veis, que s&atilde;o
ligados &agrave;
albumina durante um curto per&iacute;odo, num tr&acirc;nsito
r&aacute;pido do f&iacute;gado para os tecidos
perif&eacute;ricos.
Al&eacute;m da sua fun&ccedil;&atilde;o como
mol&eacute;cula fixadora e
de transporte, a albumina desempenha um papel importante na
nutri&ccedil;&atilde;o.</p>
<p style="text-align: justify;">Argumenta-se
que a prote&iacute;na
est&aacute; constitu&iacute;da de tal modo que &eacute;
facilmente
metabolizada, contendo todos os amino&aacute;cidos essenciais. Na
desnutri&ccedil;&atilde;o, os n&iacute;veis
plasm&aacute;ticos da
albumina diminuem muito mais que os n&iacute;veis de
gamaglobulinas. Em
casos de m&aacute; nutri&ccedil;&atilde;o, especialmente em
Kwashiorkor
(dietas deficientes em proteinas e calorias) se observam
n&iacute;veis
muito baixos.</p>
<p style="text-align: justify;">Outra
das fun&ccedil;&otilde;es
importantes da albumina<em> </em>&eacute;
a manuten&ccedil;&agrave;o
da press&atilde;o osm&oacute;tica. &Eacute;
respons&aacute;vel por 75%
da press&atilde;o coloidosm&oacute;tica do plasma. Cada grama
de
albumina s&eacute;rica exerce uma press&atilde;o
osm&oacute;tica de
5,54 mm de Hg, enquanto que a mesma quantidade de globulina
s&eacute;rica exerce uma press&atilde;o de apenas 1,43 mm de
Hg. Isto
se deve ao fato das fra&ccedil;&otilde;es de albumina
consistirem em
prote&iacute;nas de peso molecular muito mais baixo que os das
fra&ccedil;&otilde;es de gamaglobulina.</p>
<p style="text-align: justify;">Um
grama de albumina reter&aacute; 18
ml de l&iacute;quido na corrente sang&uuml;inea. Quando os
n&iacute;veis de albumina diminuem basta uns 20 g/L, com
freq&uuml;&ecirc;ncia se observa edema devido a
redu&ccedil;&atilde;o
da press&atilde;o coloidosm&oacute;tica. As
altera&ccedil;&otilde;es
dos n&iacute;veis s&eacute;ricos de albumina podem ser
resultantes de
um grande n&uacute;mero de sequelas patol&oacute;gicas e em
conseq&uuml;&ecirc;ncias n&atilde;o conhecidas</p>
<p style="text-align: justify;"><strong>EXCRE&Ccedil;&Atilde;O<br>
</strong>O catabolismo desta
prote&iacute;na passa-se principalmente em
&oacute;rg&atilde;os com elevadas taxas de metabolismo, por
exemplo,
f&iacute;gado, ba&ccedil;o, rim, m&uacute;sculos, etc. As
c&eacute;lulas incorporam got&iacute;culas de plasma por
pinocitose e
digerem o conte&uacute;do proteico at&eacute;
amino&aacute;ciodos, que
voltam a estar dispon&iacute;veis para s&iacute;nteses
proteicas.<br>
<strong> M&Eacute;TODOS</strong></p>
<p style="text-align: justify;">Por
ser uma prote&iacute;na
est&aacute;vel com problemas m&iacute;nimos de heterogenidade,
a
albumina &eacute; facilmente estudada por v&aacute;rios
m&eacute;todos
qu&iacute;micos e imunol&oacute;gicos. A capacidade que a
albumina tem
para fixar e transportar pequenas mol&eacute;culas &eacute;
explorada
nas provas de fixa&ccedil;&atilde;o de corantes, atualmente de
ampla
utiliza&ccedil;&atilde;o. Dado que os pacientes podem ter a
albumina
j&aacute; parcialmente saturada por medicamentos correntes como a
aspirina ou por metab&oacute;litos como a bilirrubina, os
m&eacute;todos de fixa&ccedil;&atilde;o de corantes podem
fornecer
valores falsamente baixos. Os m&eacute;todos
imunoqu&iacute;micos para
estudo da albumina parecem n&atilde;o ser afetados pelas
fra&ccedil;&otilde;es moleculares transportadas e
est&atilde;o
recebendo crescente aten&ccedil;&atilde;o no
laborat&oacute;rio
cl&iacute;nico. Praticamente todos os m&eacute;todos
imunoqu&iacute;micos, para an&aacute;lise de
prote&iacute;nas
sol&uacute;veis, t&ecirc;m sido aplicados &agrave;
an&aacute;lise da
albumina.</p>
<p style="text-align: justify;"><strong>1
&ndash; M&eacute;todo de
Precipita&ccedil;&atilde;o</strong></p>
<p style="text-align: justify;">As
primeiras t&eacute;cnicas para a
an&aacute;lise de albumina se basearam na
precipita&ccedil;&atilde;o
&aacute;cida ou com salina ou com solventes.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lises: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: As
altera&ccedil;&otilde;es na carga negativa da
prote&iacute;na causam a
sua precipita&ccedil;&atilde;o .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro .</p>
<p style="text-align: justify;">Como
n&atilde;o podem ser automatizadas
facilmente, os m&eacute;todos de precipita&ccedil;&atilde;o</p>
<p style="text-align: justify;">tem
somente interesse hist&oacute;rico.</p>
<p style="text-align: justify;"><strong>2
&ndash; M&eacute;todo do
Triptofano</strong></p>
<p style="text-align: justify;">A
medi&ccedil;&atilde;o da albumina
pode ser realizada mediante a determina&ccedil;&atilde;o direta
de
globulina baseada no conte&uacute;do de triptofano, calculando
albumina
por subtra&ccedil;&atilde;o da globulina a partir das
prote&iacute;nas
totais. O conte&uacute;do de triptofano da albumina
s&eacute;rica
&eacute; de 7 a 10% do presente na globulina, em base ponderada.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: &aacute;cido
glix&iacute;lico + triptofano presente na globulina .</p>
<p style="text-align: justify;">Prote&iacute;na
Total &ndash; Globulina
= Albumina .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: Se relaciona bem
com a eletroforese, por&eacute;m requer a
medi&ccedil;&atilde;o da
prote&iacute;na total.</p>
<p style="text-align: justify;">Os
m&eacute;todos por
determina&ccedil;&atilde;o de triptofano nunca foram muito
usados
devido a simplicidade e especificidade dos m&eacute;todos para
albumina
por fixa&ccedil;&atilde;o de corantes.</p>
<p style="text-align: justify;"><strong>3
&ndash; M&eacute;todo por
Eletroforese</strong></p>
<p style="text-align: justify;">A
albumina s&eacute;rica pode ser
determinada quantitativamente por t&eacute;cnicas
eletrofor&eacute;ticas. A eletroforese &eacute; a
migra&ccedil;&atilde;o de part&iacute;culas carregadas
eletricamente,
em uma solu&ccedil;&atilde;o eletrol&iacute;tica, pela
passagem de uma
corrente el&eacute;trica atrav&eacute;s de uma
solu&ccedil;&atilde;o.
V&aacute;rios componentes proteicos de uma mistura, como o plasma,
em
pH acima e abaixo de seus pontos isoel&eacute;tricos,
migrar&atilde;o
em velocidades vari&aacute;veis em tal
solu&ccedil;&atilde;o, porque
possuem diferentes cargas na superf&iacute;cie da
part&iacute;cula. As
prote&iacute;nas, assim, tender&atilde;o a separar-se em
camadas
distintas. A amostra a analisar &eacute; dissolvida em um
tamp&atilde;o
adequado (para o plasma, usualmente, &eacute; o dietilbarbiturato
de
s&oacute;dio 0,1 N, em pH 8,6). A mistura, em seguida, &eacute;
colocada na c&eacute;lula de vidro, em forma de U, do aparelho de
eletroforese de Tiselius, e os eletrodos positivo e negativo
s&atilde;o
ligados as extremidades da c&eacute;lula. Quando a corrente
&eacute;
aplicada, inicia-se a migra&ccedil;&atilde;o dos componentes da
prote&iacute;na. As mol&eacute;culas de albumina, que
s&atilde;o
menores e de cargas mais elevadas, apresentam a velocidade de
migra&ccedil;&atilde;o mais r&aacute;pida, seguidas por
v&aacute;rias
globulinas. Depois de algum tempo, podem ser notados os limites entre
as fra&ccedil;&otilde;es separadas em virtude das
diferen&ccedil;as no
&iacute;ndice de refra&ccedil;&atilde;o, causadas pelas
varia&ccedil;&otilde;es das concentra&ccedil;&otilde;es
de
prote&iacute;na. O registro fotogr&aacute;fico dessas
varia&ccedil;&otilde;es constitui o que se denomina de
padr&atilde;o
eletrofor&eacute;tico.</p>
<p style="text-align: justify;">No
plasma humano normal, 6 faixas
distintas foram identificadas. Elas s&atilde;o designadas, na ordem
de
sua mobilidade decrescente, como albumina, alfa 1 e alfa 2 globulinas,
betaglobulinas, fibrinog&ecirc;nio e gama globulina.</p>
<p style="text-align: justify;">A
distribui&ccedil;&atilde;o dos
componentes eletrofor&eacute;ticos do soro humano normal
&eacute; a
seguinte :</p>
<div></div>
<div>
<table border="1" bordercolor="#000000" cellpadding="4" cellspacing="0"
 width="100%">
  <colgroup><col width="128*"><col width="128*"></colgroup><tbody>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western"><b>Albumina</b></p>
      </td>
      <td width="50%">
      <p class="western" align="center"><b>52
a 65%</b></p>
      </td>
    </tr>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western">Globulina</p>
      </td>
      <td width="50%">
      <p class="western" align="center">24 a 29,5%</p>
      </td>
    </tr>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western">Alfa-1</p>
      </td>
      <td width="50%">
      <p class="western" align="center">2,5 a 5%</p>
      </td>
    </tr>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western">Alfa-2</p>
      </td>
      <td width="50%">
      <p class="western" align="center">7 a 13%</p>
      </td>
    </tr>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western">Beta</p>
      </td>
      <td width="50%">
      <p class="western" align="center">8 a 14%</p>
      </td>
    </tr>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western">Gama</p>
      </td>
      <td width="50%">
      <p class="western" align="center">12 a 22%</p>
      </td>
    </tr>
    <tr valign="top">
      <td width="50%">
      <p class="western">Fibrinog&ecirc;nio</p>
      </td>
      <td sdval="0,065" sdnum="1046;0;0,00%" width="50%">
      <p class="western" align="center">6,50%</p>
      </td>
    </tr>
  </tbody>
</table>
</div>
<div style="text-align: justify;"><br>
- Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo .</div>
<div>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: A albumina &eacute;
separada das outras prote&iacute;nas em um campo
el&eacute;trico.-
Amostra: Soro .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: muito trabalhoso,
por&eacute;m muito exato.</p>
<p style="text-align: justify;">4
&ndash; M&eacute;todo
Imunoqu&iacute;mico :</p>
<p style="text-align: justify;">Os
m&eacute;todos imunol&oacute;gicos
empregados para a determina&ccedil;&atilde;o de albumina
s&eacute;rica
incluem a Imunodifus&atilde;o Radial (RID) e a
Eletroimunodifus&atilde;o (EID) nos quais a albumina se difunde de
forma passiva (RID) ou sofre uma eletroforese (EID) em uma fase
estacion&aacute;ria (como agarose) que cont&eacute;m anticorpos
antialbumina. As linhas de precipita&ccedil;&atilde;o formadas
pela
rea&ccedil;&atilde;o entre a albumina e o anticorpo se fixam e
coram.
Na Imunodifus&atilde;o Radial o di&acirc;metro dos halos de
precipita&ccedil;&atilde;o formado &eacute; proporcional a
concentra&ccedil;&atilde;o de albumina.</p>
<p style="text-align: justify;">A
&ndash; Imunodifus&atilde;o Radial :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: A prote&iacute;na
difunde atrav&eacute;s de um meio que cont&eacute;m anticorpo
espec&iacute;fico.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro e L&iacute;quido Cefalo
Raquidiano.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: M&eacute;todo de
Refer&ecirc;ncia, por&eacute;m o tempo de
incuba&ccedil;&atilde;o
&eacute; muito</p>
<p style="text-align: justify;">prolongado.</p>
<p style="text-align: justify;">B
&ndash; Eletroimunodifus&atilde;o :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: A prote&iacute;na
migra em um campo el&eacute;trico atrav&eacute;s de um meio com
anticorpo espec&iacute;fico.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: M&eacute;todo de
Refer&ecirc;ncia, bastante trabalhoso .</p>
<p style="text-align: justify;">A
rea&ccedil;&atilde;o entre a albumina
e o anticorpo espec&iacute;fico pode ser seguida por turbidimetria
ou
nefelometria. Os complexos Anticorpo &ndash; Albumina que se formam
aumentam absor&ccedil;&atilde;o (turbidimetria) ou a
dispers&atilde;o
(nefelometria) da luz incidente, o qual pode relacionar-se com a
concentra&ccedil;&atilde;o da albumina. Se disp&otilde;e de
nefel&ocirc;metros automatizados e a t&eacute;cnica
turbidim&eacute;trica tamb&eacute;m tem sido adaptada a
an&aacute;lises
automatizadas.</p>
<p style="text-align: justify;">C
&ndash; Turbidimetria :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: Os complexos
Ant&iacute;geno &ndash; Anticorpo diminuem a
transmiss&atilde;o de luz
em maior propor&ccedil;&atilde;o que o Ant&iacute;geno
livre.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: Custo muito
elevado dos reativos .</p>
<p style="text-align: justify;">D
&ndash; Nefelometria :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: Os complexos
Ant&iacute;geno &ndash; Anticorpo dispersam a luz em maior
quantidade
que o Ant&iacute;geno livre.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro e L&iacute;quido Cefalo
Raquidiano.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: Custo muito
elevado dos rativos.</p>
<p style="text-align: justify;">E
&ndash; Radioimunoensaio :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: A albumina marcada
radioativamente compete com a albumina da amostra por uma quantidade
determinada de anticorpos.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro e L&iacute;quido
C&eacute;falo Raquidiano.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: Usado
principalmente para a Urina.</p>
<p style="text-align: justify;">F
&ndash; Enzimoimunoensaio :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: Ensaio tipo
&ldquo;sanduiche &ldquo; onde se empregam anticorpos fixados a
uma
superf&iacute;cie e anticorpos marcados com peroxidase.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro e L&iacute;quido Cefalo
Raquidiano.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: M&eacute;todo
novo.</p>
<p style="text-align: justify;">Atualmente
poucos laborat&oacute;rios
empregam as t&eacute;cnicas imunol&oacute;gicas para a
determina&ccedil;&atilde;o de albumina no soro.</p>
<p style="text-align: justify;">5
&ndash; M&eacute;todo por
Fixa&ccedil;&atilde;o de Corantes :</p>
<p style="text-align: justify;">Os
m&eacute;todos por
fixa&ccedil;&atilde;o de corantes s&atilde;o os mais
empregados para a
determina&ccedil;&atilde;o da albumina s&eacute;rica. A
albumina tem a
propriedade de se fixar a uma variedade de &acirc;nions
org&acirc;nicos,incluindo mol&eacute;culas complexas de
corantes. Tem
sido empregado uma grande variedade de corantes incluindo:</p>
<p style="text-align: justify;">A
&ndash; Alaranjado de Metila :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: A albumina se fixa
a um corante e modifica o perfil espectral deste.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: N&atilde;o
espec&iacute;fico para a albumina.</p>
<p style="text-align: justify;">B
&ndash; HABA (&Aacute;cido 2 &ndash;
[4&rsquo;- hidroxiazobenzeno] benz&oacute;ico) .</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: Igual ao anterior.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: Espec&iacute;fico
para a albumina, pouca sensibilidade, onde h&aacute; a
interfer&ecirc;ncia de muitos f&aacute;rmacos.</p>
<p style="text-align: justify;">C
&ndash; PBC ( P&uacute;rpura de
Bromocresol ) :</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: Igual ao anterior.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Soro.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: Espec&iacute;fico
para a albumina; as albuminas de origem animal n&atilde;o se fixam
em
forma equivalente a de origem humana.</p>
<p style="text-align: justify;">D
&ndash; Azul de Bromofenol:</p>
<p style="text-align: justify;">-
Tipo de An&aacute;lise:
Semiquantitativo.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Princ&iacute;pio: O azul de
bromofenol colocado em uma tira reativa vira de amarelo para azul em
presen&ccedil;a de albumina.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Amostra: Urina.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Coment&aacute;rios: N&atilde;o
espec&iacute;fico, muito sens&iacute;vel a albumina e muito
usado para
a prova de prote&iacute;nas na urina.</p>
<p style="text-align: justify;">E
&ndash; VERDE DE BROMOCRESOL :</p>
<p style="text-align: justify;">Dosagem
: Albumina</p>
<p style="text-align: justify;">M&eacute;todo
: Verde de Bromocresol</p>
<p style="text-align: justify;">Amostra
: Soro</p>
<p style="text-align: justify;">Comprimento
de Onda : 629 nm</p>
<p style="text-align: justify;">Linearidade
: 60 g / L</p>
<p style="text-align: justify;">Valores
de Refer&ecirc;ncia : O
intervalo de refer&ecirc;ncia segundo a idade e o sexo se apresenta
mais adiante . (ver quadro abaixo)</p>
<table style="height: 82px;" border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"
 width="100%">
  <tbody>
    <tr style="text-align: center;">
      <td style="text-align: center;" colspan="3" valign="top"
 width="100%"><strong>HOMENS</strong></td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189"><strong>IDADE</strong></td>
      <td valign="top" width="189"><strong>ALBUMINA,
g/L</strong></td>
      <td valign="top" width="189"><strong>mmol</strong><strong>/L</strong></td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189">21-44</td>
      <td valign="top" width="189">33,3-61,2</td>
      <td valign="top" width="189">0,50-0,92</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189">45-54</td>
      <td valign="top" width="189">29,1-61,2</td>
      <td valign="top" width="189">0,44-0,92</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189">55-93</td>
      <td valign="top" width="189">31,6-54,6</td>
      <td valign="top" width="189">0,48-0,82</td>
    </tr>
  </tbody>
</table>
<table style="height: 82px;" border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"
 width="100%">
  <tbody>
    <tr>
      <td style="text-align: center;" colspan="3" valign="top"
 width="100%"><strong>MULHERES</strong></td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189"><strong>IDADE</strong></td>
      <td valign="top" width="189"><strong>ALBUMINA,
g/L</strong></td>
      <td valign="top" width="189"><strong>mmol</strong><strong>/L</strong></td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189">20-44</td>
      <td valign="top" width="189">27,8-56,5</td>
      <td valign="top" width="189">0,42-0,85</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189">45-54</td>
      <td valign="top" width="189">24,6-54,4</td>
      <td valign="top" width="189">0,37-0,82</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="189">55-81</td>
      <td valign="top" width="189">32,0-52,8</td>
      <td valign="top" width="189">0,48-0,80</td>
    </tr>
  </tbody>
</table>
</div>
<div>
<p style="text-align: justify;">Os
intervalos normais para
crian&ccedil;as e rec&eacute;m-nascidos s&atilde;o menores
do que os
encontrados para adultos . Em rec&eacute;m-nascidos &eacute; de
29 a 55
g/L (0,44 a 0,83 mmol/L) e em crian&ccedil;as de 38 a 55 g/L( 0,57
a
0,80 mmol/L) .- Tipo de An&aacute;lise: Quantitativo.-
Princ&iacute;pio: A albumina &eacute; detectada
gra&ccedil;as ao
fen&ocirc;meno denominado &ldquo;erro proteico dos indicadores
&rdquo;
que ocasiona uma mudan&ccedil;a na cor de determinados indicadores,
na
presen&ccedil;a de albumina, meio tamponado. O verde de bromocresol
reage com a albumina, formando um complexo corado de cor verde, que
&eacute; medido, fotometricamente.- Amostra: Soro.</p>
<p style="text-align: justify;">-
Reativos :</p>
<p style="text-align: justify;">a
&ndash; Solu&ccedil;&atilde;o estoque
de verde de bromocresol (VBC) .</p>
<p style="text-align: justify;">A
uma quantidade de aproximadamente 50
mL de &aacute;gua destilada , adicionar 50 mg de verde de
bromocresol,
6,5 mL de hidr&oacute;xido de s&oacute;dio 1 N, 3 mL de
&aacute;cido
l&aacute;ctico a 90 % e 1 mL de &ldquo;Tween 80&rdquo;.
Misturar,
ajustar o pH da solu&ccedil;&atilde;o a 4, com &aacute;cido
l&aacute;ctico e completar a 100 mL, com &aacute;gua destilada.</p>
<p style="text-align: justify;">b
&ndash; Reativo de uso :</p>
<p style="text-align: justify;">Diluir
a solu&ccedil;&atilde;o estoque
anterior a 1/5, com &aacute;gua destilada. Preparar na hora do uso.</p>
<p style="text-align: justify;">c
&ndash; Padr&atilde;o de albumina com
3 g/dL .</p>
<p style="text-align: justify;">Dissolver
3 g de albumina bovina
fra&ccedil;&atilde;o V, em &aacute;gua destilada,
at&eacute; completar
100 mL.</p>
<p style="text-align: justify;">-
T&eacute;cnica :</p>
<p style="text-align: justify;">a
&ndash; Marcar tr&ecirc;s tubos, B
(Branco), P (Padr&atilde;o) e A (Amostra), adicionando 10mL do
reativo
do uso em todos eles.</p>
<p style="text-align: justify;">b
&ndash; A seguir, pipetar,
respectivamente :</p>
<p style="text-align: justify;">Tubo
P : 0,02 mL do padr&atilde;o de
albumina .</p>
<p style="text-align: justify;">Tubo
A : 0,02 mL da amostra .</p>
<p style="text-align: justify;">c
&ndash; Misturar e deixar, em
repouso, por 10 minutos, &agrave; temperatura ambiente.</p>
<p style="text-align: justify;">d
&ndash; Ler as absorb&acirc;ncias, em
630 nm ou filtro vermelho, acertando o zero com o branco .</p>
<p style="text-align: justify;">e
&ndash; C&aacute;lculo</p>
<p style="text-align: justify;">Absorb&acirc;ncia
da Amostra x 3 = g de
albumina/dL</p>
<p style="text-align: justify;">Absorb&acirc;ncia
do Padr&atilde;o</p>
<p style="text-align: justify;">Determina&ccedil;&atilde;o
Automatizada
da Albumina do Soro pela Rea&ccedil;&atilde;o Imediata com o
Verde de
Bromocresol</p>
<p style="text-align: justify;">O
m&eacute;todo para
determina&ccedil;&atilde;o da albumina do soro descrito neste
trabalho
&eacute; baseado na rea&ccedil;&atilde;o r&aacute;pida
entre a albumina
e um reativo de cor, o verde de bromocresol (BCG). Rodkey foi o
primeiro a descrever o m&eacute;todo, o qual foi
aperfei&ccedil;oado
por Doumas et al. As condi&ccedil;&otilde;es finais de
rea&ccedil;&atilde;o utilizadas neste trabalho, s&atilde;o
as descritas
por Doumas et al., por&eacute;m com um aperfei&ccedil;oamento
da
t&eacute;cnica..</p>
<p style="text-align: justify;">Os
resultados obtidos pelo
m&eacute;todo do BCG n&atilde;o podem ser comparados com
m&eacute;todos
mais espec&iacute;ficos, onde o tempo de
rea&ccedil;&atilde;o &eacute;
mais prolongado. Isto pode ser demonstrado claramente em em soros que
apresentam baixas concentra&ccedil;&otilde;es de albumina, onde
os
valores se mostraram falsamente aumentados.</p>
<p style="text-align: justify;">Foi
recentemente demonstrado que a
rea&ccedil;&atilde;o com BCG se processa em duas etapas. A
albumina
seria a respons&aacute;vel pela rea&ccedil;&atilde;o
imediata, enquanto
outras prote&iacute;nas do soro seriam respons&aacute;veis pela
rea&ccedil;&atilde;o tardia. Houve uma boa
compara&ccedil;&atilde;o
entre os valores de albumina imediata obtidos pelo m&eacute;todo do
BCG
e por m&eacute;todos imunol&oacute;gicos e estes resultados
foram
confirmados por outros autores.</p>
<p style="text-align: justify;">Em
uma revis&atilde;o sobre albumina
foi questionado o desenvolvimento de m&eacute;todos automatizados,
baseados nesta rea&ccedil;&atilde;o imediata, sendo que dois
sistemas
foram descritos.</p>
<p style="text-align: justify;">Os
dois sistemas de an&aacute;lise
utilizados foram o LKB 2086 Reaction Rate Analyser e um sistema de
m&uacute;ltiplas an&aacute;lises(multichannel analysis system),
LKB
2480 Prisma. Para adequar o m&eacute;todo manual a estes dois
sistemas
automatizados, foram utilizados reagentes mais concentrados para
iniciar a rea&ccedil;&atilde;o entre o BCG e soro dos pacientes
previamente dilu&iacute;dos com &aacute;gua destilada.</p>
<p style="text-align: justify;">1)
Material e M&eacute;todos:</p>
<p style="text-align: justify;">&middot;
Reagentes:</p>
<p style="text-align: justify;">Reaction
rate analyser: O reagente de
BCG, utilizado aqui &eacute; cinco vezes mais concentrado que o
descrito por Doumas et al.</p>
<p style="text-align: justify;">1
&ndash; Solu&ccedil;&atilde;o
&ldquo;stock&rdquo; de BCG (3,0 mmol/L): Dissolver 419 mg de
verde de
bromocresol em 10,0 mL de uma solu&ccedil;&atilde;o de
hidr&oacute;xido
de s&oacute;dio 0,10 mol/L em um tubo de ensaio com tampa. Deixar
homogeneizando aproximadamente 12 horas em um homogeinizador
rotat&oacute;rio com invers&atilde;o. Transferir para um
bal&atilde;o
volum&eacute;trico de 200 mL e completar o volume com
&aacute;gua
destilada.</p>
<p style="text-align: justify;">2
&ndash; Solu&ccedil;&atilde;o
&ldquo;stock&rdquo; de &aacute;cido succ&iacute;nico
(500 mmol/L):
Dissolver 59,5 g de &aacute;cido succ&iacute;nico em cerca de
800
&ndash; 900 mL de &aacute;gua destilada, em agitador
magn&eacute;tico a
temperatura ambiente por aproximadamente 12 horas. Diluir para 1 L com
&aacute;gua destilada.</p>
<p style="text-align: justify;">3
&ndash; Solu&ccedil;&atilde;o
&ldquo;stock&rdquo;de Surfactante Brij &ndash; 35 (300
g/L): Dissolver
30 g de surfactante &ldquo;Brij &ndash; 35&rdquo; em
&aacute;gua
destilada para um volume final de 100 mL, em agitador
magn&eacute;tico
por aproximadamente 12 horas. Isso resultar&aacute; em um
l&iacute;quido com alta viscosidade.</p>
<p style="text-align: justify;">4
&ndash; Reativo de Cor: Diluir 50 mL
de solu&ccedil;&atilde;o &ldquo;stock&rdquo;de BCG com
150 mL de
&aacute;cido succ&iacute;nico. Adicionar 4,0 mL de
solu&ccedil;&atilde;o &ldquo;stock&rdquo; de Brij
&ndash; 35. Ajustar o
pH pr&oacute;ximo a 4,2 adicionando solu&ccedil;&atilde;o
de
hidr&oacute;xido de s&oacute;dio 5 mol/L. O ajuste final deve
ser feito
gotejando, cuidadosamente. Depois do pH ajustado ele deve ser
verificado em uma solu&ccedil;&atilde;o obtida pela mistura de
1,0 mL
do reativo de cor com 4,0 mL de &aacute;gua destilada. O pH da
solu&ccedil;&atilde;o dilu&iacute;da deve ser de 4,20 +/-
0,05.</p>
<p style="text-align: justify;">Multichannel
Analysis System:</p>
<p style="text-align: justify;">A
concentra&ccedil;&atilde;o do reativo
de cor utilizado &eacute; tr&ecirc;s vezes maior do que a
utilizada por
Doumas et al. As solu&ccedil;&otilde;es
&ldquo;stock&rdquo;s&atilde;o
preparadas como anteriormente.</p>
<p style="text-align: justify;">Reativo
de Cor: Diluir 50 mL da
solu&ccedil;&atilde;o &lsquo;stock&rdquo; de BCG com
150 mL da
slou&ccedil;&atilde;o &ldquo;stock&rdquo; de
tamp&atilde;o succinato e
adicionar 130 mL de &aacute;gua destilada. Adicionar 4,0 mL da
solu&ccedil;&atilde;o &ldquo;stock&rdquo; de Brij
&ndash; 35 300 g/L.
Ajustar o pH como descrito anteriormente, exceto que para a
verifica&ccedil;&atilde;o do pH devem ser utilizados 2,0 mL do
reativo
de cor com 4,0 mL de &aacute;gua destilada.</p>
<p style="text-align: justify;">Padr&atilde;o:
Foi utilizado um
padr&atilde;o de prote&iacute;nas (Kabi). Este
padr&atilde;o &eacute;
uma solu&ccedil;&atilde;o 100 g/L de albumina humana pura (98
%) com pH
7,3; sem estabilizantes ou preservativos. Este padr&atilde;o foi
dilu&iacute;do para 20, 40 e 60 g/L.</p>
<p style="text-align: justify;">Soro
controle: O soro controle
utilizado foi preparado pela mistura de amostras de soro de 100
doadores de sangue aparentemente saud&aacute;veis.
Al&iacute;quotas
deste pool de soro foram transferidas para pequenos tubos e congeladas.</p>
<p style="text-align: justify;">2)
Equipamentos:</p>
<p style="text-align: justify;">O
primeiro sistema utilizado foi o LKB
2086 Reaction Rate Analyser com o LKB 2076 Diluidor/Dispensador
Pneum&aacute;tico.</p>
<p style="text-align: justify;">O
segundo sistema utilizado foi o 2480
Prisma, um sistema m&uacute;ltiplo de an&aacute;lises. Este
&eacute; um
sistema modular com uma unidade central processando m&oacute;dulos
e
unidades de suporte. Ele realiza no m&aacute;ximo 300 amostras por
hora
mas foi utilizado para fazer apenas 150 amostras por hora.</p>
<p style="text-align: justify;">Os
tubos de amostra s&atilde;o
colocados em suportes. Al&iacute;quotas da amostra s&atilde;o
transferidas para os compartimentos de
distribui&ccedil;&atilde;o das
amostras, os quais se movem ao longo do analizador, passando ao
m&oacute;dulo processador. Quando alcan&ccedil;ar um
m&oacute;dulo
processador, a quantidade requerida de amostra para cada
an&aacute;lise
&eacute;, por meio de um transportador de amostra, medida e
transferida
para uma posi&ccedil;&atilde;o do suporte rotat&oacute;rio
(quadro 1).
No suporte ratat&oacute;rio h&aacute; oito tubos, cada um dos
quais
pode ser utilizado para uma an&aacute;lise. H&aacute;
tamb&eacute;m um
tubo central, o qual &eacute; utilizado para a
dilui&ccedil;&atilde;o
das amostras. Cada m&oacute;dulo de processamento possui duas
trilhas
de processamento, individualmente termostatizadas. Uma trilha possui 30
supotes rotat&oacute;rios movendo-se no sentido hor&aacute;rio
em uma
cadeia cont&iacute;nua. Os componentes do analosador podem ser
colocados em diferentes posi&ccedil;&otilde;es para misturar,
diluir,
adicionar reagentes, medir as absorb&acirc;ncias e lavar.</p>
<p style="text-align: justify;">Os
diferentes componentes e
m&oacute;dulos s&atilde;o supervisionados e controlados por um
mini
computador. Outro miniconputador &eacute; utilizado para selecionar
as
an&aacute;lises a serem realizadas na amostra de soro, processar os
valores medidos e apresentar os resultados, dando tamb&eacute;m
informa&ccedil;&otilde;es estat&iacute;sticas.</p>
<p style="text-align: justify;">3)
Procedimento:</p>
<p style="text-align: justify;">Reaction
Rate Analyser: Com diluidor
autom&aacute;tico, adicionar 35 mL da amostra de soro,
padr&atilde;o ou
soro controle para 1000 mL de &aacute;gua destilada, em tubos
pequenos.
Depois homogeneizar, diluir al&iacute;quotas de 35 mL destes tubos
com
1000 mL de &aacute;gua destilada, em cubetas de poliestireno.</p>
<p style="text-align: justify;">Comprimento
de Onda: 629 nm</p>
<p style="text-align: justify;">Temperatura:
25, 30, 32, 35 ou 37 o C</p>
<p style="text-align: justify;">Volume
Dispensado: 250 mL</p>
<p style="text-align: justify;">Tempo:
1 min. ou 30 seg</p>
<p style="text-align: justify;">Estabelecer
primeiro a
padroniza&ccedil;&atilde;o do aparelho, incluindo a medida de
absorb&acirc;ncias com &aacute;gua destilada. Para isso,
colocar 1000
mL de &aacute;gua, dentro de 10 cubetas em um suporte. Zerar o
aparelho. Depois de zerado, o aparelho permanece est&aacute;vel por
v&aacute;rias horas.</p>
<p style="text-align: justify;">O
aparelho &eacute; agora preparado
para correr as amostras e os padr&otilde;es previamente
dilu&iacute;dos.</p>
<p style="text-align: justify;">A
medida do reagente de BCG a 629 nm
&eacute; muito sens&iacute;vel a mudan&ccedil;as de
temperatura.</p>
<p style="text-align: justify;">Multichannel
Analysis System: Os
padr&otilde;es, soros controles e amostras de soro s&atilde;o
colocados
em suportes, os quais s&atilde;o colocados no local de
carregamento. As
amostras s&atilde;o, ent&atilde;o, transferidas para um sistema
de
distribui&ccedil;&atilde;o de amostras. Uma al&iacute;quota
da amostra
&eacute; transferida para o suporte rotativo como demonstrado na
tabela
1, onde ser&atilde;o realizados os pr&oacute;ximos passos. O
suporte
rotativo esta localizado em um processador termostatizado, no qual a
temperatura &eacute; mantida a 25 o C. A absorb&acirc;ncia
&eacute;
medida com um Fot&ocirc;metro.</p>
<p style="text-align: justify;">4)
C&aacute;lculos:</p>
<p style="text-align: justify;">Reaction
Rate Analyser: Os resultados
s&atilde;o apresentados como na tabela 2.</p>
<table style="height: 307px;" border="1" cellpadding="0" cellspacing="0"
 width="100%">
  <tbody>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">EIA</td>
      <td valign="top" width="100">Manual
BCG</td>
      <td colspan="4" valign="top" width="399">BCG no LKB 2086, g/L
&agrave;:</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">g/L</td>
      <td valign="top" width="100"></td>
      <td valign="top" width="100">25
      <sup>o</sup>
C</td>
      <td valign="top" width="100">30
      <sup>o</sup>
C</td>
      <td valign="top" width="100">35
      <sup>o</sup>
C</td>
      <td valign="top" width="100">37
      <sup>o</sup>
C</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">8,6</td>
      <td valign="top" width="100">9,4</td>
      <td valign="top" width="100">10,1</td>
      <td valign="top" width="100">10,3</td>
      <td valign="top" width="100">11,2</td>
      <td valign="top" width="100">11,1</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td style="text-align: center;" valign="top" width="100">21,4</td>
      <td valign="top" width="100">22,0</td>
      <td valign="top" width="100">20,0</td>
      <td valign="top" width="100">20,6</td>
      <td valign="top" width="100">20,8</td>
      <td valign="top" width="100">21,4</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">23,0</td>
      <td valign="top" width="100">22,3</td>
      <td valign="top" width="100">19,1</td>
      <td valign="top" width="100">19,9</td>
      <td valign="top" width="100">20,1</td>
      <td valign="top" width="100">20,0</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">24,5</td>
      <td valign="top" width="100">24,3</td>
      <td valign="top" width="100">20,0</td>
      <td valign="top" width="100">20,2</td>
      <td valign="top" width="100">20,4</td>
      <td valign="top" width="100">20,1</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">28,4</td>
      <td valign="top" width="100">28,0</td>
      <td valign="top" width="100">28,9</td>
      <td valign="top" width="100">28,9</td>
      <td valign="top" width="100">29,1</td>
      <td valign="top" width="100">29,9</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">29,6</td>
      <td valign="top" width="100">31,0</td>
      <td valign="top" width="100">29,4</td>
      <td valign="top" width="100">29,1</td>
      <td valign="top" width="100">29,6</td>
      <td valign="top" width="100">31,7</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">30,3</td>
      <td valign="top" width="100">31,1</td>
      <td valign="top" width="100">32,3</td>
      <td valign="top" width="100">31,6</td>
      <td valign="top" width="100">32,6</td>
      <td valign="top" width="100">32,2</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">32,3</td>
      <td valign="top" width="100">33,4</td>
      <td valign="top" width="100">33,6</td>
      <td valign="top" width="100">34,1</td>
      <td valign="top" width="100">33,9</td>
      <td valign="top" width="100">33,7</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">-</td>
      <td valign="top" width="100">32,2</td>
      <td valign="top" width="100">32,2</td>
      <td valign="top" width="100">34,7</td>
      <td valign="top" width="100">34,5</td>
      <td valign="top" width="100">33,7</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">35,9</td>
      <td valign="top" width="100">38,0</td>
      <td valign="top" width="100">36,6</td>
      <td valign="top" width="100">35,5</td>
      <td valign="top" width="100">36,2</td>
      <td valign="top" width="100">36,2</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">36,6</td>
      <td valign="top" width="100">40,0</td>
      <td valign="top" width="100">40,1</td>
      <td valign="top" width="100">39,9</td>
      <td valign="top" width="100">39,7</td>
      <td valign="top" width="100">40,2</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">38,1</td>
      <td valign="top" width="100">40,1</td>
      <td valign="top" width="100">36,6</td>
      <td valign="top" width="100">36,9</td>
      <td valign="top" width="100">37,2</td>
      <td valign="top" width="100">37,5</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">-</td>
      <td valign="top" width="100">40,0</td>
      <td valign="top" width="100">39,2</td>
      <td valign="top" width="100">40,1</td>
      <td valign="top" width="100">40,2</td>
      <td valign="top" width="100">39,5</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">42,4</td>
      <td valign="top" width="100">43,0</td>
      <td valign="top" width="100">42,6</td>
      <td valign="top" width="100">42,7</td>
      <td valign="top" width="100">43,0</td>
      <td valign="top" width="100">42,4</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">44,0</td>
      <td valign="top" width="100">47,0</td>
      <td valign="top" width="100">46,2</td>
      <td valign="top" width="100">45,7</td>
      <td valign="top" width="100">46,0</td>
      <td valign="top" width="100">46,6</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">47,8</td>
      <td valign="top" width="100">47,0</td>
      <td valign="top" width="100">47,7</td>
      <td valign="top" width="100">48,4</td>
      <td valign="top" width="100">48,8</td>
      <td valign="top" width="100">48,4</td>
    </tr>
    <tr style="text-align: center;">
      <td valign="top" width="100">47,8</td>
      <td valign="top" width="100">46,0</td>
      <td valign="top" width="100">48,5</td>
      <td valign="top" width="100">49,5</td>
      <td valign="top" width="100">49,7</td>
      <td valign="top" width="100">49,4</td>
    </tr>
  </tbody>
</table>
</div>
<div style="text-align: justify;">Os
resultados mais precisos
s&atilde;o os obtidos quando extrapolados ao momento de
adi&ccedil;&atilde;o do reativo de cor. Isto pode ser feito
manualmente, como demonstrado na tabela 3, ou automaticamente por um
computador. S&atilde;o lidas as absorb&acirc;ncias de cada
padr&atilde;o e das amostras de soro. &Eacute;
tra&ccedil;ada uma curva
padr&atilde;o e as concentra&ccedil;&otilde;es
s&atilde;o obtidas a
partir dela. Um modo mais simples &eacute; utilizar um
padr&atilde;o
para obter um fator, o qual &eacute; utilizado no
c&aacute;lculo das
concentra&ccedil;&otilde;es das amostras. Isto &eacute;
v&aacute;lido
porque a curva padr&atilde;o &eacute; linear e passa
atrav&eacute;s da
origem.</div>
<div>
<p style="text-align: justify;">Sistema
M&uacute;ltiplo de
An&aacute;lise: As absorb&acirc;ncias obtidas s&atilde;o
automaticamente transferidas para um microcomputador, onde
s&atilde;o
realizados os c&aacute;lculos. Os resultados s&atilde;o
calculados a
partir de uma solu&ccedil;&atilde;o padr&atilde;o, desde
que este
sistema forne&ccedil;a uma curva padr&atilde;o linear que passe
atrav&eacute;s da origem.</p>
<p style="text-align: justify;">5)
Resultados:</p>
<p style="text-align: justify;">Reaction
Rate Analyser:</p>
<p style="text-align: justify;">a)
Linearidade e sensibilidade: A curva
padr&atilde;o de albumina, quando lida imediatamente (extrapolada)
ap&oacute;s a adi&ccedil;&atilde;o do reativo de cor
&eacute; linear
at&eacute; cerca de 60 g/L e passa atrav&eacute;s da origem. A
dilui&ccedil;&atilde;o utilizada para as amostras &eacute;
aquela
recomendada pelo aparelho utilizado desde que os resultados apresentem
uma deflec&ccedil;&atilde;o na absorb&acirc;ncia de 0,2 A
(correspondente a cerca de 65 g/L de albumina).</p>
<p style="text-align: justify;">b)
Efeito da temperatura na
rea&ccedil;&atilde;o: Uma boa compara&ccedil;&atilde;o
pode ser obtida
quando comparnado os resultados a 25 o C e 37 o C (Figura 4). Na tabela
a seguir podemos observar que n&atilde;o h&aacute;
diferen&ccedil;as
significativas quando os resultados forem determinados a 25, 30, 35 ou
37 o C. An&aacute;lises por eletroimunoensaio e manual tinham sido
determinadas anteriormente.</p>
</div>
<div style="text-align: center;"></div>
<div>
<div style="text-align: center;">
<table border="1" bordercolor="#000000" cellpadding="4" cellspacing="0"
 width="100%">
  <colgroup><col width="256*"></colgroup><tbody>
    <tr>
      <td valign="top" width="100%">
      <p class="western" align="center">Prote&iacute;nas totais (g/dL)
- <strong>albumina</strong>
(g/dL) = globulinas (g/dL)</p>
      </td>
    </tr>
  </tbody>
</table>
</div>
</div>
<p style="text-align: justify;">c)
Compara&ccedil;&atilde;o com
imunodifus&atilde;o radial:</p>
<p style="text-align: justify;">A
compara&ccedil;&atilde;o dos
resultados entre o m&eacute;todo automatizado e a
imunodifus&atilde;o
radial est&aacute; demonstrada na figura 5.</p>
<p style="text-align: justify;">d)
Precis&atilde;o:</p>
<p style="text-align: justify;">O
valor m&eacute;dio do soro controle
foi de 46,7 g/L, foram realizadas 20 an&aacute;lises com um desvio
padr&atilde;o de 0,3 g/L. Em an&aacute;lises realizadas em dias
alternados o desvio padr&atilde;o foi de 1,0 g/L. Em
an&aacute;lises de
soros de 162 pacientes realizadas em duplicatas (em diversos dias)
observou-se um desvio padr&atilde;o de 0,74 g/L entre as duplicatas.</p>
<p style="text-align: justify;">Multichannel
Analysis Sistem:</p>
<p style="text-align: justify;">a)
Linearidade: A curva padr&atilde;o
&eacute; linear at&eacute; 60 g/L e passa atrav&eacute;s da
origem.</p>
<p style="text-align: justify;">b)
Compara&ccedil;&atilde;o com o
m&eacute;todo manual: Os resultados obtidos do Multichannel
Analysis
Sistem e do m&eacute;todo manual est&atilde;o demonstrados na
Figura 6.
Os resultados foram obtidos a partir de seis corridas diferentes,
realizadas em um per&iacute;odo de tr&ecirc;s meses.</p>
<p style="text-align: justify;">c)
Precis&atilde;o: O soro controle foi
analizado em 21 dias diferentes, sendo feitas 50 a 100
an&aacute;lises
por dia, com um padr&atilde;o di&aacute;rio. Houve um desvio de
0,21 a
0,58 g/L, sendo de geralmente 0,3 g/L.</p>
<p style="text-align: justify;">6)
Discuss&atilde;o:</p>
<p style="text-align: justify;">A
rea&ccedil;&atilde;o entre o verde de
bromocresol e a albumina, ocorre quase que imediatamente. Entretanto
n&atilde;o h&aacute; nenhum equipamento comercial que possa
medir a
absorb&acirc;ncia imediatamente ap&oacute;s a
adi&ccedil;&atilde;o do
reativo de cor. Torna-se, assim, necess&aacute;rio investigar
outras
solu&ccedil;&otilde;es para o problema. Uma delas consiste em
extrapolar os resultados obtidos at&eacute; o tempo de
adi&ccedil;&atilde;o do reativo de cor, outra consiste em
minimizar o
tempo, at&eacute; que n&atilde;o haja erros significativos.
Utilizando
o segundo m&eacute;todo, foi encontrado que resultados
aceit&aacute;veis s&atilde;o obtidos quando a
rea&ccedil;&atilde;o
&eacute; realizada entre 8-10 segundos.</p>
<p style="text-align: justify;">Outro
importante fator, &eacute; o
diluente utilizado na pr&eacute; dilui&ccedil;&atilde;o.
Diferentes
diluentes tem sido utilizados. &Aacute;gua destilada demonstrou ser
o
melhor porque o uso de outors diluentes co cloreto de s&oacute;dio
9g/L
ou tamp&atilde;o succinato usado no reagente forneceram resultados
falsamente aumentados. H&aacute; provavelmente um rearranjo
conformacional de uma ou mais prote&iacute;nas que reagem mais
lentamente com BCG, nas amostras dilu&iacute;das. O rearranjo
prot&eacute;ico ent&atilde;o reage imediatamente com o reagente
de BCG
como se fosse a albumina. Entretanto, &eacute; poss&iacute;vel
que
altas concentra&ccedil;&otilde;es de imunoglobulinas em alguns
soros
causem precipita&ccedil;&atilde;o quando dilu&iacute;das
com
&aacute;gua. Este erro n&atilde;o &eacute; levado em conta
devido
&agrave; grande dilui&ccedil;&atilde;o do soro utilizada na
mistura
final de rea&ccedil;&atilde;o.</p>
<p style="text-align: justify;">H&aacute;
pequenos acr&eacute;scimos de
leituras de rea&ccedil;&atilde;o com aumentos da temperatura.
Assim
seria de se esperar que os piores resultados obtidos, quando comparados
com o m&eacute;todo imunol&oacute;gico, fossem os realizados a
37 o C
mas foram obtidos bons resultados, mesmo sob estas
condi&ccedil;&otilde;es. &Eacute; importante manter o
sistema
termostatizado porque a absorb&acirc;ncia do reagente de BCG
(branco)
&eacute; sens&iacute;vel a mudan&ccedil;as de temperatura.
Altas
temperaturas provocam aumentos das absorb&acirc;ncias. Isto
n&atilde;o
&eacute; o caso do complexo albumina &ndash; BCG.</p>
<p style="text-align: justify;">Com
o outro sistema utilizado, curvas
padr&otilde;es lineares passando atrav&eacute;s da origem foram
obtidas. Isto facilita o uso de somente um padr&atilde;o, por
exemplo,
40 g/L, nos m&eacute;todos de rotina. Este padr&atilde;o
&eacute;
corrido diversas vezes em um lote de amostras a fim de nos fornecer
resultados dignos de confian&ccedil;a para o c&aacute;lculo dos
soros
dos pacientes. Foram comparados os resultados de m&eacute;todos
imunol&oacute;gicos e o m&eacute;todo do BCG utilizando o
Reaction Rate
Analyser, bem como o m&eacute;todo manual de BCG e o
m&eacute;todo
utilizando o Multichannel analysis System. Os resultados finais podem
ser melhorados, diminuindo-se os tempos de
rea&ccedil;&otilde;es.</p>
<p style="text-align: justify;">&Eacute;
demonstrado que a
rea&ccedil;&atilde;o imediata da albumina com o BCG pode ser
realizada
por diferentes sistemas automatizados de an&aacute;lise tendo uma
boa
compara&ccedil;&atilde;o com os m&eacute;todos
imunol&oacute;gicos.
Assim, &eacute; poss&iacute;vel realizar
determina&ccedil;&otilde;es da
albumina automaticamente, utilizando pouco reagente e a um baixo custo
para o laborat&oacute;rio de maneira r&aacute;pida e simples.</p>
<p style="text-align: justify;">INTERPRETA&Ccedil;&Atilde;O</p>
<p style="text-align: justify;">A
s&iacute;ntese da albumina ocorre
muito cedo no desenvolvimento fetal. Pela quarta &agrave; sexta
semana
de gesta&ccedil;&atilde;o, o saco vitelino e as
c&eacute;lulas
hep&aacute;ticas produzem prote&iacute;nas que s&atilde;o
imunologicamente identific&aacute;veis como a albumina. Os valores
dos
adultos s&atilde;o atingidos pela vig&eacute;sima e
vig&eacute;sima-sexta semanas de gesta&ccedil;&atilde;o e
por
conseguinte o soro do sangue do cord&atilde;o t&ecirc;m um
conte&uacute;do completo desta prote&iacute;na. Os valores de
albumina
s&eacute;rica mant&ecirc;m-se notavelmente est&aacute;veis
no
indiv&iacute;duo normal at&eacute; uma idade
avan&ccedil;ada,
come&ccedil;amdo ent&atilde;o uma tend&ecirc;ncia para uma
descida
significativa. As mulheres t&ecirc;m geralmente valores menores que
os
homens da mesma idade.</p>
<p style="text-align: justify;">Os
valores da albumina diminuem durante
a gravidez, &agrave; medida que esta avan&ccedil;a e algumas
mulheres
sofrem varia&ccedil;&otilde;es dos valores da albumina
plasm&aacute;tica durante o ciclo menstrual. A
modifica&ccedil;&atilde;o com contraceptivos n&atilde;o
afeta de
maneira significativa os valores da albumina.</p>
<p style="text-align: justify;">A
hipoalbuminemia &eacute; uma marca
distintiva de desnutri&ccedil;&atilde;o proteica, quer esta
seja devida
a &ldquo;Kwashiorkor&rdquo;, alcoolismo, parasitoses,
doen&ccedil;as
malignas ou &agrave; s&iacute;ndrome de
&ldquo;ch&aacute; e
torradas&rdquo; das pessoas idosas que vivem sozinhas. Os baixos
n&iacute;veis s&eacute;ricos de albumina est&atilde;o mais
frequentemente associados com inflama&ccedil;&otilde;es
cr&ocirc;nicas
e doen&ccedil;as graves agudas. Contudo, se o processo difere ou
n&atilde;o do anterior, i.e. ,suprimento insuficiente de
amino&aacute;cidos, continua sendo mat&eacute;ria de
discuss&atilde;o.
V&aacute;rios medicamentos citot&oacute;xicos t&ecirc;m um
efeito
depressor sobre a s&iacute;ntese das prote&iacute;nas
plasm&aacute;ticas, incluindo a albumina. Nas crian&ccedil;as,
a
hipoalbuminemia e o edema perif&eacute;rico est&atilde;o
estreitamente
associados; no adulto, o edema &eacute; menos previs&iacute;vel.</p>
<p style="text-align: justify;">Valores
muito baixos de albumina fazem
prever doen&ccedil;as graves seja por aumento das perdas e/ou
aumento
do catabolismo, seja por diminui&ccedil;&atilde;o da
s&iacute;ntese.
Estados patol&oacute;gicos como a cirrose alco&oacute;lica,
acompanhados de hipoalbuminemia, resultam muitas vezes de
desnutri&ccedil;&atilde;o proteica e de uma
diminui&ccedil;&atilde;o do
tecido hep&aacute;tico funcionante. Nos pacientes, cuja
doen&ccedil;a
se acompanha de hipertens&atilde;o portal, a mal
absor&ccedil;&atilde;o
aumenta o problema. Desde que lhe sejam fornecidos os materiais para a
s&iacute;ntese em quantidades adequadas, o f&iacute;gado
&eacute; capaz
de manter n&iacute;veis suficientes de albumina s&eacute;rica,
mesmo
havendo perdas moderadamente grandes pelo rim; contudo, os pacientes
nefr&oacute;ticos, mesmo bem alimentados podem ter baixos
n&iacute;veis
s&eacute;ricos de albumina quando persiste a
inflama&ccedil;&atilde;o
ativa.</p>
<p style="text-align: justify;">N&iacute;veis
significativamente
diminu&iacute;dos de albumina, em indiv&iacute;duos sem
defici&ecirc;ncias cong&ecirc;nitas de albumina, acompanham e
s&atilde;o acompanhados por muitas doen&ccedil;as da homeostase.</p>
<p style="text-align: justify;">A
hiperalbuminemia usualemente &eacute;
atribu&iacute;da a uma desidrata&ccedil;&atilde;o ou
hemoconcentra&ccedil;&atilde;o.</p>
<p style="text-align: justify;">Nos
&uacute;ltimos anos tem se aplicado
o termo microalbuminemia para a excre&ccedil;&atilde;o
urin&aacute;ria
aumentada de albumina. Esta condi&ccedil;&atilde;o esta
relacionada com
problemas diab&eacute;ticos que logo manifestam uma enfermidade
renal.
O limite superior de excre&ccedil;&atilde;o de albumina nos
adultos
normais &eacute; de 12 a 15 mg/min. A
defini&ccedil;&atilde;o
operacional de microalbuminemia &eacute; de 15 a 30 mg/min a 150
mg/min. O esfor&ccedil;o f&iacute;sico, hipertens&atilde;o,
infec&ccedil;&atilde;o do trato urin&aacute;rio e
enfermidade
card&iacute;aca tamb&eacute;m podem aumentar a
excre&ccedil;&atilde;o
urin&aacute;ria de albumina. A import&acirc;ncia da
determina&ccedil;&atilde;o de microalbumin&uacute;ria,
surge da
observa&ccedil;&atilde;o de que os diab&eacute;ticos com
uma
excre&ccedil;&atilde;o urin&aacute;ria menor que 15 mg/min
tem menos
probabilidade de desnevolver uma nefropatia com poss&iacute;vel
insufici&ecirc;ncia renal na d&eacute;cada seguinte,
por&eacute;m
aqueles com n&iacute;veis de excre&ccedil;&atilde;o
superior tem esta
probabilidade aumentada.</p>
<p style="text-align: justify;">A
analbuminemia cong&ecirc;nita
&eacute; uma s&iacute;ndrome muito rara, em que os pacientes
s&atilde;o
capazes de sintetizar apenas quantidades muito pequenas de albumina
(inferior a 0,5% do normal), s&oacute; mensur&aacute;veis por
m&eacute;todos muito sens&iacute;veis. O interesse
cl&iacute;nico
destes pacientes localiza-se no fato deles apresentarem poucos
problemas atribu&iacute;dos a defici&ecirc;ncia de albumina,
apesar do
papel fundamental que a albumina tem na
manuten&ccedil;&atilde;o da
press&atilde;o osm&oacute;tica e no transporte e armazenagem de
subst&acirc;ncias com baixo peso molecular. O valor das
prote&iacute;nas totais nesta indiv&iacute;duos varia entre 45
a 57
g/L, sendo a press&atilde;o coloidosm&oacute;tica do plasma
aproximadamente metade da esperada; n&atilde;o obstante, o edema
perif&eacute;rico, quando existente, &eacute; moderado. A
invulgar e
inesperada benignidade da defici&ecirc;ncia de um t&atilde;o
importante
componente sang&uuml;ineo, indica que a albumina pode na verdade
n&atilde;o ser t&atilde;o importante como geralmente se pensa.</p>
<p style="text-align: justify;">Interferentes</p>
<p style="text-align: justify;">a
&ndash; N&atilde;o utilizar amostras
muito hemolisadas. Aparentemente, 1 mg% de hemoglobina ocasiona aumento
de 1 mg% de albumina.</p>
<p style="text-align: justify;">b
&ndash; H&aacute; aumento pela
interfer&ecirc;ncia da amplicilina, nas
desidrata&ccedil;&otilde;es,
nas lipemias, no exerc&iacute;cio muscular, no uso inadequado de
torniquete na coleta.</p>
<p style="text-align: justify;">c
&ndash; H&aacute;
diminui&ccedil;&atilde;o da albumina nas hepatopatias,
&ldquo;stress&rdquo;, traumas, m&aacute;
nutri&ccedil;&atilde;o e
s&iacute;ndrome nefr&oacute;tica.</p>
<p style="text-align: justify;">Notas</p>
<p style="text-align: justify;">a
&ndash; O soro &eacute;
est&aacute;vel por tr&ecirc;s dias, em refrigerador e uma
semana, em
congelador.</p>
<p style="text-align: justify;">b
&ndash; A rea&ccedil;&atilde;o do
verde de bromocresol depende da natureza da albumina utilizada; a
albumina bovina difere da albumina humana cristalizada.
Conv&eacute;m,
portanto, padronizar a solu&ccedil;&atilde;o de albumina bovina
com
soros, de valores conhecidos.</p>
<p style="text-align: justify;">c
&ndash; Soros moderadamente
lip&ecirc;micos n&atilde;o interferem na
rea&ccedil;&atilde;o .</p>
<p style="text-align: justify;">d
&ndash; Os anticoagulantes a serem
utilizados, no caso de plasmas, s&atilde;o a heparina e o EDTA.</p>
<p style="text-align: justify;">e
&ndash; &Eacute; recomend&aacute;vel
a utiliza&ccedil;&atilde;o de pipeta de hemoglobina ou
autom&aacute;tica para a adi&ccedil;&atilde;o da amostra e
do
padr&atilde;o. Limpar o lado externo da pipeta e lavar
tr&ecirc;s vezes
com o pr&oacute;prio reativo.</p>
<p style="text-align: justify;">f
&ndash; A recupera&ccedil;&atilde;o
do m&eacute;todo &eacute; de 99% e a precis&atilde;o
&eacute; de 5%.</p>
<p style="text-align: justify;">g
&ndash; A vidraria deve estar
perfeitamente limpa , pois os &aacute;cidos e &aacute;lcalis
interferem
nos resultados .</p>
<p style="text-align: justify;">h
&ndash; Com a
diminui&ccedil;&atilde;o da albumina temos aparecimento de
edemas, pois
as prote&iacute;nas t&ecirc;m papel importante na
distribui&ccedil;&atilde;o dos l&iacute;quidos
org&acirc;nicos. Quando
os n&iacute;veis s&atilde;o inferiores a 2 g/dL quase sempre
h&aacute;
aparecimento de edemas.</p>
<p style="text-align: justify;">i
&ndash; Tendo-se os valores de
prote&iacute;nas totais e de albumina, o valor das globulinas pode
ser:</p>
<p style="text-align: justify;">REFER&Ecirc;NCIAS
BIBLIOGR&Aacute;FICAS</p>
<ol style="text-align: justify;">
  <li>BOREL, J. et al . <span style="font-weight: bold;">Como
Prescrever e Interpretar um Exame Laboratorial</span>
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. 3 ed. Buenos Aires : Hasa , 1960 . p.387 . 1084 p.</li>
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Bromcresol Green Reagent</span>.
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  <li>HARPER , H. A. et al . <span style="font-weight: bold;">Manual
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Atheneu , 1982 . p.203 . 736 p.</li>
  <li>KAPLAN , L. A. &amp;
PESCE , A. J. <span style="font-weight: bold;">Qu&iacute;mica
Cl&iacute;nica</span> .
Buenos Aires : Panamericana , 1990 . p.1075 a 1083 . 1380 p.</li>
  <li>KARLSON , P. et al . <span style="font-weight: bold;">Patobioqu&iacute;mica
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Rio de Janeiro : Guanabara Koogan , 1982 . p.267 . 321 p.</li>
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Bioqu&iacute;mica para M&eacute;dicos</span>
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Laborat&oacute;rio para o Cl&iacute;nico .</span>
6 ed. S&atilde;o
Paulo : Livraria Atheneu, 1989. p.26 e 27 . 549 p.</li>
  <li>MOURA , R. A. et al . <span style="font-weight: bold;">T&eacute;cnicas
de Laborat&oacute;rio</span> . 2
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  <li>&nbsp;________ .
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p.86 a 88 . 511 p.</li>
  <li>STRYER , L. <span style="font-weight: bold;">Bioqu&iacute;mica</span>
.&nbsp; 4&ordm;ed. Rio de Janeiro : Guanabara Koogan . 1992 .
p.235 .
881 p.</li>
</ol>
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